vwin基于我们专有的原核和真核核糖体显示技术,建立了独特的核糖体显示平台。核糖体展示平台是一个优越的平台在体外无细胞平台,生成肽,蛋白质和抗体库,具有无与伦比的多样性多达1015; 因此,可以从库中分离出针对各种目标的极高亲和力结合物。特别是,我们的核糖体展示抗体库可以产生具有pM亲和力的抗体,这是抗体生产技术所达到的最高亲和力。
核糖体显示是一个完全无细胞系统在体外从大型文库中选择蛋白质和肽。因为它是完全执行的在体外,它规避了许多弊端体内系统。它可以显示非常大的库,适合生成有毒的、蛋白质水解敏感的和不稳定的蛋白质,也允许在确定的位置上进行氨基酸修饰。在核糖体显示中,单个新生蛋白质通过形成稳定的蛋白质-核糖体-mRNA复合体(PRM)与相应的mRNA配对,该复合体是基因型和表型之间的物理联系。从靶结合复合物中分离出mrna,逆转录并扩增为DNA,用于进一步操作和蛋白表达。PRM复合体非常稳定。在适当的条件下,可保持数天的完整性,为严格的筛选提供了良好的途径。此外,核糖体显示允许同时分离功能新生蛋白,通过对配体的亲和力,以及编码的mRNA。
图1所示。核糖体显示原理
vwinCreative Biolabs提供了几种核糖体显示系统,其中包括:
核糖体显示的第一个公开描述是使用大肠杆菌S30提取系统。vwin创造性的生物学实验室提供大肠杆菌用于核糖体展示的S30无细胞裂解液,可偶联或非偶联转录和翻译。
真核无细胞系统能够进行多种翻译后修饰,扩大了显示功能相关蛋白质的可能性。Creative Biolabs提供用于核糖体显示的兔网织红细胞裂解物系统。该系统采用了vwin原位在此过程中,DNA通过一种新型的扩增直接在核糖体复合物上获得原位不分离核糖体复合物的RT-PCR程序。
RIDS被认为是肽和蛋白质选择和进化的强大技术,对蛋白质工程有用。RIDS是一种编码毒素的基因,能使真核核糖体失活,蓖麻毒素a链(RTA)在序列库下游融合,使复合物形成。因此,在标准翻译条件下,无需去除终止密码子即可分离出功能蛋白。
核糖体显示技术有许多应用,包括但不限于:
由于核糖体显示可以避免文库限制,并能够筛选更大的文库,因此从组合文库中选择高亲和力、特异性配体结合肽越来越受欢迎。我们最多可以提供10个12-1014组合肽库生成高质量的肽。
vwinCreative Biolabs开发了核糖体展示系统,用于针对多种多肽和蛋白质靶标进行单链抗体的表型选择。在这个过程中,序列进化和筛选可以同时进行。
核糖体展示除用于筛选抗体外,还可用于非抗体蛋白的亲和选择。vwinCreative Biolabs已经开发了一种系统,使用亲和标签来分离蛋白质的prm复合物,而不是抗体。亲和标签可以融合到蛋白质的n端,用于核糖体显示。此外,我们还可以选择与酶结合的多肽/蛋白或显示功能蛋白,用于药物靶标识别和蛋白质功能识别等应用。
结合DNA突变,核糖体展示为蛋白质进化提供了强有力的手段体外培养。这种方法为抗体成熟和改善生物物理性质提供了一种很好的方法。我们通过低保真DNA聚合酶、诱变方法和同源重组提供DNA进化。
核糖体显示技术是一种有价值的工具在体外蛋白质稳定性和亲和力的定向进化有两大优势:(1)核糖体展示文库的多样性不受细菌细胞转化效率的限制;(2) 在随后的循环中,随机突变可以很容易地引入到选定的DNA池中。基于这项技术,我们有信心为优化蛋白质亲和力和稳定性提供优质的端到端服务。
核糖体显示技术是一种无细胞显示技术在体外催化活性的选择。结合先进的随机诱变技术和核糖体展示库的构建和筛选,Creative Biolabs为酶活性的选择和提高提供了全方位的解决方案。vwin
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