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Solution-sorting库筛选

vwin是主要的服务提供者的噬菌体展示抗体库建设和筛选。为了选择高亲和力和特异性抗体,我们已经开发出一种串行,biopan方法,如固相的选择,基于单元的选择,和在活的有机体内选择。其中之一,solution-sorting筛查是另一种选择方法的重要性。vwin开发了一个优化的过程来选择定制抗体与抗原的解决方案。

噬菌体展示库筛选可以进行各种抗原来源,如纯化抗原,细胞溶解产物,整个细胞,和组织。如今,选择纯化抗原仍是最可行和有效的方法。然而,这个方法的有效性取决于固定化抗原。传统的固相的选择涉及到抗原在固体表面上的涂层。如微量滴定板或塑料表面immunotube直接吸附纯化抗原,导致一些蛋白质的构象变化向塑料暴露疏水接口。尽管它是一种有效的方法,它仍然不能适用于所有的目标。一些选择绑定可能无法绑定可溶性抗原的构象。作为一种替代方法,在溶液中平移的方法介绍了目标绑定解决方案,克服了构象变化的问题当在固相涂层。

solution-sorting筛选的过程

可溶性的目标将孵化噬菌体展示抗体库。目标可能包括6 xhis,销售税或MBP亲和标签,以及用生物素标记。抗原浓度的精确控制可以通过使用标记抗原。与此同时,减少抗原的浓度将允许噬菌体与高亲和力抗体的选择由于更高的严格的选择。

孵化后,phage-antigen复杂将被链霉亲和素,谷胱甘肽或镍珠。磁选择将丰富绑定进行噬菌体抗体。为了避免偶然的选择特别的噬菌体抗体绑定珠子,消极的选择可能包括与噬菌体酝酿珠子没有目标。在这个步骤中,上层清液将收集的下一轮的选择。三轮的选择,绑定可以充实。

图。1 Solution-sorting筛查。
图。1 Solution-sorting筛查。

vwin具有丰富的专业知识在噬菌体展示和证明的记录生成的高亲和性抗体以节省成本且及时的方式。Solution-sorting筛查是有利的抗原浓度的精确控制和避免目标抗原的构象变化的可能性。与其他先进技术集成,亲和力成熟和抗体等工程,我们能够提供最全面筛查服务和定制的建议从你感兴趣的噬菌体展示库分离所需的绑定。

参考:
cham P,巴蒂D。噬菌体展示和生物素化的抗原选择[J]。抗体工程,2010:151 - 164。
Matz J,cham P。噬菌体展示和纯化抗原选择[J]。抗体工程:方法和协议,第二版,2012:213 - 224。




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