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cDNA图书馆建设服务

创意生物实验室在噬菌体展示和抗体工程领域一直是专家和市场领导者。通过我们无与伦比的噬菌体展示平台,vwin为全球客户提供cDNA图书馆建设的综合服务。

互补DNA(cDNA)是逆转录的mRNA。由于缺乏与基因组DNA相比的大的非编码内含子,真核cDNA文库代表某一特定细胞类型中所有临时转录基因的编码序列。借助噬菌体显示技术,整个cDNA产物可以通过融合蛋白vwin电子竞技在噬菌体表面表达。因此,可以识别大量的蛋白质候选物,以及针对不同目标分离特定的粘合剂。在过去的几十年里,噬菌体展示cDNA文库已广泛应用于抗原/抗体的发现。徳赢疫苗设计临床治疗和诊断,等。

常规噬菌体显示技术在构建复杂cDNA文库中遇到了障碍,如靶基因浓度低,由于聚(a)尾的3'区域,经常出现在帧终止密码子中,以及原始mRNA的限制性结构。这些因素导致功能性无性系产量低,这阻碍了噬菌体展示cDNA库几十年的发展。为了解决这些问题,vwin成功地建立了多种独特的技术来产生高质量、大容量的cDNA库,高密度,方向正确。

构建噬菌体显示cDNA库的标准程序是按照以下步骤执行的:


此外,vwin有信心裁剪无懈可击的噬菌体展示不同类型的cDNA库,包括:

标准cDNA库
如果需要紧急使用直接筛选和下游应用程序,我们可以构建至少3×10的标准cDNA库。平均插入大小至少为1KB的主克隆。我们保证所有克隆的表达方向正确,特异性cDNA克隆的抗体筛选或分离。

全长cDNA文库
我们新的全长cDNA合成程序结合了降低RNase H逆转录酶活性的专有工艺和独特的mRNA分离技术。5'帽全长浓缩,以及减少低聚物(dt)启动。一起,这些步骤大大提高了使用全长插入构建库的可能性,确保后续筛查成功率高。

标准化cDNA文库
特殊规范化程序创意生物实验室可降低中、高丰度无性系的流行率,从而有效地消除了偏倚序列。因此,标准化的cDNA文库可以成为一个强有力的工具来发现罕见的基因。徳赢

减法cDNA文库
当假定目标基因表达水平低时,这种技术特别适用。采用专有的自减法和组织减法技术,我们可以减少不相关的丰富序列10-100倍,更容易找到目标。

vwin,M13或T7噬菌体系统可根据不同的目标用于cDNA文库的构建。与此同时,我们还提供了通过lambda噬菌体载体构建的cDNA库作为替代方案。基于丰富的经验和我们多功能的噬菌体展示平台,vwin专门构建高质量的自定义cDNA库。科学家vwin将采用最先进的技术制定一个全面、系统的计划,以实现我们客户的具体研究目标。

图1。噬菌体cDNA文库的制备。(伯克等。2000) 图1。噬菌体cDNA文库的制备。(伯克等。2000)

参考文献
伯克A.Zipursky年代。还有浅薄的,H.(2000)“分子细胞生物学第4版”,纽约:W。H.Freeman。




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