二价抗原亲和力测量服务

创新生物实验室的科学家在二价抗原的亲和力和动力学测量方面拥有强大的专业知识和丰富的经验,能够满足您的任何特定需求。Creative Biolabs基于Biacore、ProteOn和Octet系统,提供表面等离子体共振(SPR)和生物层干涉测vwin量(BLI)服务,用于高效无标签亲和性测量。您可以指望我们在整个项目中为您提供帮助。

实时测定相互作用动力学是双核系统最重要的应用。然而,动力学分析的结果仅与选择用于评估的相互作用模型的上下文相关。虽然传感器图的形状有时可以为选择合适的模型提供提示,但实际上不可能从检测到的动力学中知道结合模型。

图1。将实验数据拟合到数学模型并不意味着该模型是合适的,因为同一组数据也可能拟合其他几个模型。在本例中,拟合的接近度不能可靠地区分二价分析物模型(左)和异构配体模型(右)。(Biacore分析手册)图1。将实验数据拟合到数学模型并不意味着该模型是合适的,因为同一组数据也可能拟合其他几个模型。在本例中,拟合的接近度不能可靠地区分二价分析物模型(左)和异构配体模型(右)。(Biacore分析手册)

出于上述原因,Creative Biolabs使用不同的动力学模vwin型为二价抗原提供亲和性测量服务。目前,二价抗原和抗体相互作用分析有两种情况:与二价抗原结合的单价抗体;与二价抗原结合的二价抗体。

1.单价抗原-单价抗体结合模型
该模型描述了一个抗原A分子与一个抗体B分子结合:

Ka为缔合速率常数,Kd为离解速率常数。Ka为缔合速率常数,Kd为离解速率常数。

2.二价抗原-单价抗体结合模型
该模型描述了单价抗体和携带两个单独结合位点的抗原之间的相互作用。

Ka1和Kd1是第一个位点的缔合和解离速率常数,而Ka2和Kd2分别是第二个位点的缔合和解离速率常数。Ka1和Kd1是第一个位点的缔合和解离速率常数,而Ka2和Kd2分别是第二个位点的缔合和解离速率常数。

一旦在第一个分析物位点发生结合,在第二个位点发生的结合由于抗原和抗体的接近而变得容易。同样,在两个位点捕获的抗原在两个位点发生解离之前不会从表面释放,因此观察到的解离速率比单个抗原结合位点的解离速率慢得多。值得注意的是,第二个位点的缔合速率常数以RU为单位-1s-1(响应单元)。这是因为这两种相互作用的组分都存在于表面上,并以RU测量,而不是以真实浓度测量。

3.二价抗原二价抗体结合模型
该模型描述了携带两个单独结合位点的抗原与二价抗体的相互作用。二价抗原和二价抗体之间的交联导致微团簇或大团簇的形成(蒙特卡罗研究)。

图2。蒙特卡罗研究中二价抗原抗体相互作用的一个例子。通过抗原交联表示各种形式的B细胞聚集。(细胞与分子免疫法,2011年)图2。蒙特卡罗研究中二价抗原抗体相互作用的一个例子。通过抗原交联表示各种形式的B细胞聚集。(细胞与分子免疫法,2011年)

参考

  1. A.S.Reddy等人(2011年)。通过抗原交联和定向转运介导的B细胞受体聚集的蒙特卡罗研究。细胞,免疫分子。8: 255-264.
    Biacore分析手册29-0194-00 AA版,GE Healthcare,第9-P14页。

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